顾雪芳 潘文明 韦庆华 汪成忠
摘要 该研究对不同叶色的矾根新优品种‘花毯‘栀子黄和‘红色警戒3个品种进行了组织培养，通过对矾根采取外植体的不同部位及消毒方法的设计，结果表明，‘花毯的底芽更容易诱导出芽体，而‘红色警戒‘栀子黄则取花梗作为外植体培养较底芽更容易诱导出芽体，花梗诱导培养基的最佳浓度为 MS+BA 1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L，底芽诱导培养基的最佳浓度为MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L。3个品种的矾根在继代阶段的增殖率具有明显的差异，其增殖率高低顺序分别为‘花毯>‘栀子黄>‘红色警戒。继代培养基配方浓度为MS+BA 1.0 g/L+NAA 0.01 mg/L，生根壮苗培养基为1/2MS+活性炭1g/L，以芽丛切成3芽/瓶最好，平均根系数最多，且长势健壮。
关键词 矾根；
彩叶新品种；
组织培养；
‘花毯；
‘栀子黄；
‘红色警戒
中图分类号 S688.4 文献标识码 A
文章编号 1007-7731（2023）04-0014-04
矾根（Heuchera micrantha）为虎耳草科矾根属多年生彩色观叶植物，近年来作为优秀的耐寒地被植物被广泛应用于花境、立体绿化和盆栽等。矾根品种繁多，由于叶色丰富且叶型奇特，受到了园艺和绿化人士的喜爱。为了满足市场需求，用组织培养方法可以实现矾根的快速繁殖，在短期内生产出大量整齐、均匀的健壮种苗，并为矾根的规模化生产提供参考。
1 材料与方法
1.1 供式材料
于2021年3月24日对种植在苏州农业职业技术学院相城校区科技园基地大棚内盆栽的3个矾根品种进行了取材，3个矾根的品种名分别为‘花毯‘栀子黄‘红色警戒（见图1），颜色依次为绿色、黄色、红色。
1.2 试验方法
3个品种在外植体的选材上选取了2种：底芽和花梗。通过设置0.1%氯化汞4个处理时间，30 d后统计出污染数、成活瓶数及出芽数等，便将成活的小芽转入3个不同细胞分裂素浓度（BA 0.5、1.0、1.5 mg/L）的芽诱导培养基中，45 d后观察和统计总芽数，并对3个品种的花梗和底芽的芽诱导率进行对比。再将芽体转接到增殖培养基中，通过方差分析对3个品种的增殖系数进行对比。生根壮苗阶段则采用统一培养基配方，接种芽体为1、2和3芽这3种规格，30 d后对3个品种的平均根系数及生长状况进行统计。
1.2.1 不同外植体灭菌处理方法。大棚内种植的矾根3个品种在取材前2 d停止浇水，保持盆体干燥，但植物体生长正常。外植体取材的部位是主芽旁边长出的小底芽和带花苞的花梗。将底芽去除叶片保留叶柄，而花梗则剪成3～4 cm的小段，放入加入洗洁精的自来水中，搅拌清洗3 次，再将外植体置于流水下冲洗1 h，倒尽水分。将表面清洗干净的外植体置于超净工作台上，均是先用75%乙醇浸泡30 s，再用0.1%的升汞浸泡，底芽的消毒时间为10～15 min，花梗的消毒时间为5～8min；
最后将外植体用无菌水清洗5次，吸去外植体表面的水分后，接种到MS基本培养基上，1芽/瓶，每个处理各20瓶。对2个外植体部位灭菌处理时间设2个梯度，研究对外植体污染率及出芽率的影响，得出最佳灭菌时间和外植体取材部位。
1.2.2 初代培养。30 d后，将矾根3个品种底芽和花梗分化的无菌芽体分切后，分别接种于以下3个不同浓度的诱导培养基中，编号A：MS+BA 0.5 mg/L+0.1 mg/L；
编号B：MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L；
编号C：MS+BA 1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L中。每个浓度接种20 瓶，1 芽/瓶，45 d后观察初代的芽体数量，从而筛选出最适芽诱导配方。
1.2.3 增殖培养。根据初代培养诱导出来芽的状况可以知道底芽和花梗的分化均未经历愈伤组织的过程，而是直接分化出丛生芽体，且同时发现经初代培养的苗，在培养基配方C中培养90 d后，无论是花梗还是底芽誘导的芽体均有玻璃化现象。所以在继代阶段将3 个品种的组培小苗分别接种于培养基B：MS+BA1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L中，对3个品种的增殖系数进行比较，接种时3 丛/瓶，3 株/丛，每个品种各接种30 瓶。45 d后随机抽取10 瓶瓶苗，清点总芽数，计算增殖系数。
1.2.4 生根壮苗培养。采用1/2MS基本培养基进行壮苗，并同时促进生根。在壮苗阶段接入生根培养基的苗分切成1、2和3 芽3 种规格，且编号为D、E、F。4 株/瓶，且接入的苗叶片宽度均需达到0.5 cm以上。30 d后统计3种规格苗的生长情况。
2 结果与分析
2.1 外植体的选择与灭菌时间
从表1可以看出，升汞处理时间均为8 min，‘花毯‘红色警戒和‘栀子黄3个品种外植体取花梗成活率最高，分别为80%、65%、65%；
3个品种的出芽率最高均为60%，但取材部位分别是：‘花毯的底芽、‘红色警戒和‘栀子黄的花梗，且培养过程不经过脱分化阶段便可诱导出芽体。
2.2 初代培养的芽诱导
从表2和表3可以看出，花梗和底芽的芽诱导过程中，‘花毯的底芽在代号B培养基中，诱导率最高为665%，‘红色警戒‘栀子黄花梗则在代号C培养基的诱导率最高，分别为465%和480%，但这2个品种在后期均出现玻璃化苗现象。
2.3 增殖培养的增殖系数
45 d后随机抽取10瓶瓶苗，清点总芽数，计算增殖系数。通过观察3个品种在诱导培养基的生长情况，确定继代的培养基配方为编号B，即MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L，3个品种均能实现数量稳定及增长且长势良好，但增殖系数强弱顺序为：‘花毯>‘栀子黄>‘红色警戒，分别为8.79、5.32、3.50。‘花毯的增殖系数最高，但叶片宽度最小，且没有显示与母本相似的红色叶脉。‘红色警戒虽然增殖系数最低，但叶片最大宽度能达到2 cm。具体结果见表4和图2。
2.4 壮苗和生根
3个品种的生长情况及平均根系数见表5，在增殖培养中，芽体在大规模数量增多的情况下，基部均出现了白色根系，但部分长在培养基里面的芽体较细弱，故生根培养考虑不添加激素。在壮苗和生根培养基中，3个品种叶色正常，且叶宽均能长至1.5 cm左右，接种后需要20～30 d，均能长出白色根系，叶片宽度均有小幅度增长，且苗体健壮。
3 结论
经试验结果表明，矾根的3个品种（‘花毯‘红色警戒‘栀子黄）的底芽和花梗均可以直接诱导出芽，缩短了组织培养的时间。‘花毯底芽的芽诱导率最高，‘红色警戒‘栀子黄则是花梗的芽诱导率最高。在外植体取材方面，花梗较底芽更易取得，且灭菌处理的成活率也更高。3个品种的矾根在增殖阶段表现差异较大，接种于相同配方的培养基中，增殖系数为‘花毯∶‘栀子黄∶‘红色警戒=8.79∶5.32∶3.50。说明绿叶带红条纹的‘花毯的增殖速率更高，其余2个品种次之，3个品种长势健壮，叶片宽大。生根阶段主要以壮苗为目的，同时生根也较容易，且将苗切成不同芽数的丛苗，生根的根系数也明显不同，且将苗切成3芽以上的芽丛，平均根系数多，苗体更健壮，叶宽较1芽和2芽更宽，生长健壮的生根丛生苗将为后期的出瓶炼苗奠定基础，并为矾根的快速繁殖及工厂化生产提供科学依据。
4 参考文献
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[5] 陈宏，唐莹，施月欢，等. 矾根的组织培养与快速繁殖[J]. 上海农业学，2011，27（4）：80-82.
（责编：张宏民）
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